敲低TROAP基因对胆管癌细胞系增殖和迁移能力的影响

摘要/Abstract

摘要：

目的：探究Trophinin相关蛋白（Trophinin-associated protein，TROAP）基因沉默对人胆管癌细胞系RBE细胞增殖和迁移能力的影响。方法：培养人胆管癌细胞系RBE，并对其分别转染阴性对照序列和TROAP干扰序列，分别命名为si-NC组和si-TROAP组。采用细胞计数试剂盒（CCK-8）和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力；流式细胞术检测细胞凋亡率；细胞划痕实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力；蛋白质印迹实验（Western blot）检测RBE细胞中上皮间充质化（EMT）相关蛋白E-cadherin、N-cadherin，PCNA以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和caspase-3的相对表达量。结果：与si-NC组细胞相比，si-TROAP组细胞增殖率降低，克隆个数降低，细胞凋亡率升高，迁移和侵袭能力降低（P<0.05）。与si-NC组细胞相比，si-TROAP组细胞E-cadherin蛋白相对表达水平升高，N-cadherin蛋白相对表达水平降低，Bax和caspase-3蛋白相对表达水平升高，Bcl-2和PCNA蛋白相对表达水平降低（P<0.05）。结论：TROAP基因是RBE细胞潜在的致癌基因，TROAP基因沉默可降低人胆管癌细胞系RBE细胞增殖和迁移能力，并通过缓解上皮间质转化来发挥效应。

关键词: , 胆管癌；Trophinin相关蛋白；迁移；增殖；上皮间质转化

Abstract:

Objective： To investigate the effects of Trophinin-associated protein （TROAP） gene silencing on the proliferation and migration of human cholangiocarcinoma cell line RBE.Methods： RBE cells were cultured and transfected with negative control sequence and TROAP interference sequence in si-NC group and si-TROAP group respectively. Cell proliferation ability was detected by cell counting kit-8 （CCK-8） and plate clone formation experiment. Apoptosis rate was detected by flow cytometry. Cell migration and invasion ability were detected by cell scratch test and Transwell method. The relative expressions of epithelial-mesenchymal transition （EMT） related proteins E-cadherin， N-cadherin， PCNA and apoptosis related proteins Bcl-2， Bax and caspase-3 in RBE cells were detected by Western bloting.Results： Compared with si-NC group， the cell proliferation rate and number of clones decreased， the cell apoptosis rate increased， and the cell migration and invasion ability decreased in the si-TROAP group （P<0.05）. Compared with si-NC group， the relative expression levels of E-cadherin protein increased， and the relative expression levels of N-cadherin protein decreased in the si-TROAP group； the relative expression levels of Bax and caspase-3 increased， and the relative expression levels of Bcl-2 and PCNA protein decreased in the si-TROAP group （P<0.05）.Conclusion： TROAP gene is a potential oncogene in RBE cells. TROAP silencing can reduce the proliferation and migration ability of human cholangiocarcinoma cell line RBE by alleviating epithelial-mesenchymal transition.

Key words: Cholangiocarcinoma； , Trophinin-associated protein； , Migration； , Proliferation； , Epithelial-mesenchymal transition

中图分类号:

R735.8

赵晋江, 郭伟, 梁少华, 程杰.

敲低TROAP基因对胆管癌细胞系增殖和迁移能力的影响 [J]. 中国医药导刊, 2024, 26(3): 285-290.

ZHAO Jinjiang, GUO Wei, LIANG Shaohua, CHENG Jie.

Effects of TROAP Gene Knockdown on the Proliferation and Migration of Cholangiocarcinoma Cell Lines [J]. CHINESE JOURNAL OF MEDICINAL GUIDE, 2024, 26(3): 285-290.

参考文献

［1］ Tyson GL， El-Serag HB. Risk factors for cholangiocarcinoma［J］. Hepatology， 2011，54（1）：173-184.

［2］ Blechacz B. Cholangiocarcinoma： current knowledge and new developments［J］. Gut Liver， 2017，11（1）：13-26.

［3］ Khan SA， Tavolari S， Brandi G. Cholangiocarcinoma： Epidemiology and risk factors［J］. Liver Int， 2019，39（Suppl 1）：19-31.

［4］ Andersen JB. Molecular pathogenesis of intrahepatic cholangiocarcinoma［J］. J Hepatobiliary Pancreat Sci， 2015，22（2）：101-113.

［5］邝曾书瑜，饶乐，罗碧源，等. 512例胆管细胞癌的临床及预后特点［J］.中南大学学报（医学版），2020，45（11）：1283-1290.

［6］ Long J， Huang S， Bai Y， et al. Transcriptional landscape of cholangiocarcinoma revealed by weighted gene coexpression network analysis［J］. Brief Bioinform， 2021，22（4）：bbaa224.

［7］ Du J， Lan T， Liao H， et al. CircNFIB inhibits tumor growth and metastasis through suppressing MEK1/ERK signaling in intrahepatic cholangiocarcinoma［J］. Mol Cancer， 2022，21（1）：18.

［8］ Liu H， Zhou Q， Xu X， et al. ASPM and TROAP gene expression as potential malignant tumor markers［J］. Ann Transl Med， 2022，10（10）：586-599.

［9］ Zhao ZQ， Wu XJ， Cheng YH， et al. TROAP regulates cell cycle and promotes tumor progression through Wnt/β-Catenin signaling pathway in glioma cells［J］. CNS Neurosci Ther， 2021，27（9）：1064-1076.

［10］ Jing K， Mao Q， Ma P. Decreased expression of TROAP suppresses cellular proliferation， migration and invasion in gastric cancer［J］. Mol Med Rep， 2018，18（3）：3020-3026.

［11］ Ye J， Chu C， Chen M， et al. TROAP regulates prostate cancer progression via the WNT3/survivin signalling pathways［J］. Oncol Rep， 2019，41（2）：1169-1179.

［12］ Yang S， Liu X， Yin Y， et al. Tastin is required for bipolar spindle assembly and centrosome integrity during mitosis［J］. FASEB J， 2008， 22（6）：1960-1972.

［13］ Li K， Zhang R， Wei M， et al. TROAP promotes breast cancer proliferation and metastasis［J］. Biomed Res Int， 2019， 2019：6140951-6140958.

［14］ Hu H， Xu L， Chen Y， et al. The upregulation of trophinin-associated protein （TROAP） predicts a poor prognosis in hepatocellular carcinoma［J］. J Cancer， 2019，10（4）：957-967.

［15］雷宇，黄山，路燕. 肺腺癌组织中Trophinin 相关蛋白的表达及临床病理联系［J］.安徽医科大学学报， 2020，55（1）：118-123.

［16］于澜，徐缨龙，李明，等. 肝细胞癌组织TROAP表达与上皮-间质转化的相关性［J］.胃肠病学和肝病学杂志，2022，31（10）：1183-1188.

［17］孙阁阁. TROAP对人正常肝细胞HL-7702与肝癌细胞HepG2的增殖调控机理研究［D］.河南师范大学，2021.

［18］ Lian Y， Fan W， Huang Y， et al. Downregulated trophinin-associated protein plays a critical role in human hepatocellular carcinoma through upregulation of tumor cell growth and migration［J］. Oncol Res， 2018，26（5）：691-701.

［19］ Janiszewska M， Primi MC， Izard T. Cell adhesion in cancer： Beyond the migration of single cells［J］. J Biol Chem， 2020，295（8）：2495-2505.

［20］ Mège RM， Ishiyama N. Integration of cadherin adhesion and cytoskeleton at adherens junctions［J］. Cold Spring Harb Perspect Biol， 2017，9（5）：028738-028755.

［21］刘婷，张林西. 上皮间质转化在消化系统肿瘤中的研究进展［J］.河北北方学院学报（自然科学版）， 2023，39（2）：52-56.

［22］ Luo Y， Yu T， Zhang Q， et al. Upregulated N-cadherin expression is associated with poor prognosis in epithelial-derived solid tumours： A meta-analysis［J］. Eur J Clin Invest， 2018，48（4）：12903-12916.

［23］闫丽锟. 胚胎停止发育的分子免疫机制研究［D］.青岛大学，2016.

［24］ Michiko NF， Kazuhiro S. 人类胚胎植入过程中的细胞黏附分子（英文）［J］.生理学报，2012，64（3）：247-258.

［25］王磊. 乳腺癌肺转移相关基因的研究［D］.复旦大学，2006.

［26］董家刚. Trophinin基因在胰腺癌组织中的表达及其临床意义［D］.重庆医科大学，2011.

［27］ Kaszak I， Witkowska-Piłaszewicz O， Niewiadomska Z， et al. Role of cadherins in cancer： A review［J］. Int J Mol Sci， 2020，21（20）：7624-7640.

［28］ Han SP， Yap AS. The cytoskeleton and classical cadherin adhesions［J］. Subcell Biochem， 2012，60：111-135.

[1]	戚鹏飞, 王月玲, 邵长春, 李洁, 张晓萍, 季申, 朱仁愿. 基于ICP-MS/MS测定中药白扁豆中18种无机元素及其质量评价 [J]. 中国医药导刊, 2024, 26(3): 248-253.
[2]	张磊, 孟昭平, 岳洪水, 于淼, 李萌, 鞠爱春, . 中药工业智能制造转型模式及监管问题探讨 [J]. 中国医药导刊, 2024, 26(2): 129-138.
[3]	李艺羿, 赵晓云, 胡芷若, 田金徽, . PCI患者术后康复的研究现状与前沿分析 [J]. 中国医药导刊, 2024, 26(2): 193-198.
[4]	杨雪, 吴松梅, 王茜, 陈影, 石淇允. 电针联合膀胱功能锻炼治疗脊髓损伤后神经源性膀胱的系统评价及Meta分析 [J]. 中国医药导刊, 2024, 26(2): 199-207.

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